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- FC905826
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- Órgãos: UPE - Universidade de Pernambuco - Cargos: Assistente Técnico em Gestão Universitária (UPE) · IAUPE · 2026
A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) revolucionou a pesquisa nas ciências biológicas e na medicina, e influenciou a criminologia e o direito. Diversas descobertas científicas imp
A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) revolucionou a pesquisa nas ciências biológicas e na medicina, e influenciou a criminologia e o direito. Diversas descobertas científicas importantes, incluindo a purificação da DNA polimerase e a elucidação do mecanismo de replicação do DNA, foram essenciais para o desenvolvimento da tecnologia de PCR atual. Assinale a alternativa CORRETA com relação às técnicas usadas na PCR.
- A primeira etapa é o anelamento, que ocorre a 72°C para que a DNA polimerase adicione os nucleotídeos para formar a nova fita de DNA.
- A etapa de desnaturação ocorre geralmente em baixas temperaturas, próximas de 25 °C, para evitar danos ao DNA.
- O íon magnésio (\(Mg^{2+}\)) atua como um inibidor da enzima Taq Polimerase, devendo ser totalmente removido do tampão da reação para que a amplificação ocorra.
- A PCR ocorre em três etapas principais: desnaturação do DNA, ligação dos primers (anelamento) e extensão da nova fita pela DNA polimerase.
- Na etapa de extensão, os primers são degradados para liberar nucleotídeos livres para a reação.
Gabarito
Gabarito: D
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Comentário do professor
Desnaturação, anelamento (ligação dos primers) e extensão são as três etapas fundamentais da PCR.
Na etapa de desnaturação a amostra é aquecida (≈94–98°C) para separar as duas fitas de DNA, tornando as sequências de interesse acessíveis aos primers.
No anelamento a temperatura é reduzida (geralmente 50–65°C) para que os primers se hibridem de forma complementar às fitas molde; a temperatura ideal depende do Tm dos primers e das condições salinas.
Durante a extensão uma DNA polimerase termostável (por exemplo, Taq) alonga a partir do primer incorporando dNTPs e necessitando de Mg²⁺, tipicamente a ≈72°C; a taxa é ~1 kb/min.
Repetindo essas três fases por n ciclos obtém‑se amplificação exponencial do alvo, aproximadamente \(2^n\) cópias a partir de uma única molécula inicial.