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Questão FC641329

Sobre a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) é correto afirmar que

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FGV · 2026

Sobre a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) é correto afirmar que

  1. a utilização de primers pode ser dispensada quando já se conhece a sequência do gene de interesse ou para genes muito pequenos.
  2. a enzima DNA-polimerase para copiar um molde de DNA é guiada por oligonucleotídeos iniciadores que são hibridizados do início e no fim da sequência desejada.
  3. a grande vantagem desta técnica é a velocidade da replicação do DNA, contudo só pode ser usada para o DNA nuclear celular, não servindo para o DNA mitocondrial ou o RNA.
  4. a técnica permitiu a criação de bibliotecas de DNA humano, que inclui os íntrons, exons, acentuadores e promotores, mas não os muitos trechos de DNA não codificante.
  5. nessa tecnologia, chamamos de sonda a uma enzima com ação lítica específica sobre determinada sequência do DNA de interesse, para aplicação antes da reação.
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Gabarito

B

Comentário do professor

PCR amplifica um fragmento específico de DNA usando uma DNA-polimerase que copia um molde a partir de oligonucleotídeos curtos chamados iniciadores ou primers.


Os primers são hibridizados por complementaridade às regiões flanqueadoras do alvo, um em cada fita, posicionados nas extremidades que definem o início e o fim da sequência a ser amplificada.


Ao se ligarem, fornecem a extremidade 3'-OH livre necessária para que a polimerase sintetize a nova cadeia. A especificidade da reação depende principalmente da sequência dos primers.


O processo ocorre em ciclos de desnaturação, anelamento e extensão, geralmente com uma polimerase térmicamente estável (por exemplo, Taq), resultando em amplificação exponencial do fragmento alvo.

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